期刊简介
中国科协主管，中华医学会主办。本刊是传染病、 寄生虫病专业学术期刊。主要报道传染病与寄生虫病（包括临床各科内各种感染性疾病）领域领先的科研成果和临床诊疗经验及与传染科临床密切结合的基础理论研究，交流中医、中西医结合的临床经验，介绍新理论、新方法、新技术和国际上有关传染病（感染性疾病）研究的新进展。主要设有述评、专论、基础论著、临床论著、综述、讲座、临床病理（病例）讨论、国际交流、病例报告、会议纪要及国内外学术动态等栏目。主要读者对象为广大的传染病（感染病）科医师。
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首页>中华传染病杂志
- 杂志名称：中华传染病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1000-6680
- 国内刊号：31-1365/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
载体法筛选人巨细胞病毒截短UL54基因小干扰RNA靶位体系的建立
胡妙凤；段群军；陶然；尚世强
关键词：巨细胞病毒, 基因, 病毒, RNA干扰, RNA, 小分子干扰
摘要：目的 建立载体法筛选人巨细胞病毒(HCMV)截短UL54基因(UL54S)小干扰RNA(siRNA)靶位的体系.方法 利用质粒pAVU6+27设计并构建2个小发夹RNA(shRNA)表达载体(psiUL54-1和psiUL54-2),与融合蛋白表达载体pUL54S-绿色荧光蛋白(EGFP)共转染AD293细胞.荧光显微镜观察融合蛋白荧光表达,RT-PCR法分析UL54S mRNA水平变化,流式细胞仪评价siRNA对融合蛋白的抑制作用,采用方差分析对流式细胞检测结果进行统计分析,筛选出有效的siRNA作用靶位.结果 shRNA表达载体psiUL54-2与融合蛋白表达载体pUL54S-EGFP共转染AD293细胞48 h后,pUL54S-EGFP、psiUL54-2共转染组EGFP表达量较pUL54S-EGFP、pAVU6+27共转染组下降;凝胶分析显示,psiUL54-2与pUL54S-EGFP共转染48 h后,UL54SmRNA相对表达量为19.6,明显低于pUL54S-EGFP、psiUL54-1共转染组的96.6与对照组的100.0;psiUL54-1、pUL54S-EGFP共转染48 h后对融合蛋白UL54S-EGFP表达无影响(P>0.05),但psiUL54-2、pUL54S-EGFP共转染抑制融合蛋白UL54S-EGFP的表达(19.43×104±2.29×104比27.89×104±5.50×104,P<0.01).结论 成功建立载体法筛选HCMV截短UL54S siRNA靶位体系,UL54S序列中1532～1550位点是有效的siRNA靶位点.
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