期刊简介

               中国科协主管,中华医学会主办。本刊是传染病、 寄生虫病专业学术期刊。主要报道传染病与寄生虫病(包括临床各科内各种感染性疾病)领域领先的科研成果和临床诊疗经验及与传染科临床密切结合的基础理论研究,交流中医、中西医结合的临床经验,介绍新理论、新方法、新技术和国际上有关传染病(感染性疾病)研究的新进展。主要设有述评、专论、基础论著、临床论著、综述、讲座、临床病理(病例)讨论、国际交流、病例报告、会议纪要及国内外学术动态等栏目。主要读者对象为广大的传染病(感染病)科医师。                

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  • 杂志名称:中华传染病杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1000-6680
  • 国内刊号:31-1365/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华传染病杂志2008年第07期

永生化猪肝细胞的建立及其鉴定

潘小平;杜维波;郝邵瑞;曹红翠;陈瑜;盛国平;朱春侠;盛吉芳;李兰娟

关键词:肝, 人工, 细胞系, 端粒, 末端转移酶, 永生化, 抗原, 多瘤病毒转化, 猪
摘要:目的 建立永生化的猪肝细胞系,为生物人工肝、肝细胞移植、体外药物代谢模型提供合适的细胞源.方法 应用胶原酶等四步灌流法分离获得原代猪肝细胞,以SV40大T抗原(SV40LT)和含人端粒酶反转酶(hTERT)的重组反转录病毒感染,对其进行永生化;然后,对建立的猪肝细胞系进行生物学特性鉴定.结果 原代猪肝细胞经转染含人端粒酶反转录酶和SV40大T抗原的重组反转录病毒后4~6周获得三个肝细胞样细胞克隆,其中,一个猪肝细胞克隆(HepLP)传代60代以上;永生化猪肝细胞在相差显微镜、扫描电镜和透射电镜下具有典型的肝细胞的形态;Western印迹法检测该细胞系表达人端粒酶反转录酶和SV40大T抗原.RT-PCR检测到永生化猪肝细胞表达白蛋白mRNA、ELISA双抗体夹心法检测到永生化猪肝细胞培养上清液中白蛋白的分泌,以5.0×106细胞数接种裸鼠,观察6个月无肿瘤形成.结论 新建立的无致瘤性的永生化猪肝细胞系具有正常猪肝细胞的生物学基本功能.