期刊简介

               中国科协主管,中华医学会主办。本刊是传染病、 寄生虫病专业学术期刊。主要报道传染病与寄生虫病(包括临床各科内各种感染性疾病)领域领先的科研成果和临床诊疗经验及与传染科临床密切结合的基础理论研究,交流中医、中西医结合的临床经验,介绍新理论、新方法、新技术和国际上有关传染病(感染性疾病)研究的新进展。主要设有述评、专论、基础论著、临床论著、综述、讲座、临床病理(病例)讨论、国际交流、病例报告、会议纪要及国内外学术动态等栏目。主要读者对象为广大的传染病(感染病)科医师。                

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  • 杂志名称:中华传染病杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1000-6680
  • 国内刊号:31-1365/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华传染病杂志2018年第08期

噬菌体介导的结核分枝杆菌Rv2346c基因敲除株的构建及其毒力初步研究

陈晓林;陈思遐;姚静;舒磊;邓凯丽;冯旰珠

关键词:细菌噬菌体, 分枝杆菌, 结核, 基因敲除株, Rv2346c基因
摘要:目的 利用分枝杆菌噬菌体重组系统构建结核分枝杆菌R v2346 c基因敲除株,体内感染小鼠肺组织,观察R v2346 c基因的毒力,从而探讨结核分枝杆菌R v2346 c基因功能.方法 构建同源交换位点,随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基因组,获得噬菌粒,将噬菌粒导入耻垢分枝杆菌,获得整合有同源交换位点的重组噬菌体,经体外扩增获得高滴度的重组噬菌体,对结核分枝杆菌进行转染,将转染后的结核分枝杆菌涂布到潮霉素抗性的固体培养基,37℃培养4周,挑取单克隆,通过PCR验证基因敲除成功,将野生株(wild type,WT)及敲除株(knockout,KO)结核分枝杆菌感染C57BL/6J小鼠肺组织,6~8周后观察小鼠死亡率、小鼠肺组织炎性反应程度及肺组织结核分枝杆菌体外培养菌落形成数.两组间比较采用配对t检验,率的比较采用χ2检验.结果 经鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符,且为所需目的基因片段,成功切除靶片段,体内感染小鼠6~8周,KO株感染小鼠肺组织后,体外菌落形成数明显低于WT株感染(15.0±0.8比90.0±1.5,t=23.0361,P<0.05),小鼠肺组织炎性反应程度明显轻于WT株感染(1040±89比1960±56,t=7.1016,P<0.05),其小鼠总死亡率明显低于W T株感染(53% 比20%,χ2=6.1112,P<0.05).结论 成功构建了噬菌体介导的结核分枝杆菌R v2346 c基因敲除株,为R v2346 c基因功能的研究奠定了基础.